La medición de la capacidad proagregante de los agregados de la proteína α-sinucleína (denominados semilla) en el líquido cefalorraquídeo, a través del ensayo de amplificación de semilla, es un biomarcador de diagnóstico muy sólido para la enfermedad de Parkinson. Sin embargo, hasta ahora este ensayo no había sido capaz de diferenciar correctamente entre el Parkinson y la atrofia multisistémica, un parkinsonismo atípico de gravedad y prevalencia similares a la ELA, pero muy difícil de distinguir clínicamente del Parkinson en las fases iniciales de la enfermedad.
Ahora, un equipo del Clínic-IDIBAPS ha participado en un estudio publicado en la revista The Lancet Neurology que presenta una modificación del ensayo de amplificación de semilla que sí es capaz de diferenciar entre ambas patologías.
Yaroslau Compta, del grupo de investigación Enfermedad de Parkinson y otros trastornos neurodegenerativos del movimiento: investigación clínica y experimental del IDIBAPS, del Servicio de Neurología del Clínic, del Instituto de Neurociencias UBneuro, de la Universidad de Barcelona y uno de los autores del estudio, señala: "Poder diferenciar estos dos trastornos permite acortar significativamente el tiempo de diagnóstico, lo que resulta especialmente relevante para iniciar el tratamiento adecuado a tiempo y para tener un pronóstico preciso de discapacidad y supervivencia". Y añade: "Además, esta modificación del ensayo de amplificación de semilla podría permitir incluir casos más tempranos en ensayos clínicos de terapias experimentales, un paso crítico para obtener nuevos tratamientos que frenen la progresión de esta enfermedad huérfana de tratamientos".
En el estudio se incluyeron 8 cohortes procedentes de 7 centros y 4 países. En las cohortes más enriquecidas en casos de atrofia multisistémica, el nuevo ensayo modificado alcanzó una sensibilidad del 87% y una especificidad del 77%. Por otro lado, en las dos cohortes obtenidas aplicando criterios más estrictos, incluida la del Clínic-IDIBAPS, la sensibilidad fue del 84% y la especificidad del 87%.
Ensayo de amplificación de semilla
Para realizar el ensayo de amplificación de semilla, se añade α-sinucleína recombinante no agregada a muestras biológicas (en este caso, líquido cefalorraquídeo) que se sospecha puedan contener agregados. La agitación mecánica de la muestra provoca que los agregados se fragmenten e interactúen con la proteína recombinante no agregada, promoviendo una nueva agregación. Los agregados resultantes de la reacción se detectan mediante una reacción de fluorescencia con tioflavina. Esta técnica, en su modalidad original sensible y específica para el Parkinson, está disponible en el Clínic Barcelona gracias a un proyecto del Dr. Yaroslau Compta, con el que se implementó la técnica en el IDIBAPS.
En la atrofia multisistémica, la α-sinucleína se encuentra en agregados citoplasmáticos en las células gliales, mientras que en la enfermedad de Parkinson está presente en los cuerpos de Lewy, localizados en las neuronas.
En el ensayo presentado en este trabajo, se observó que los agregados de los cuerpos de Lewy producían una fluorescencia muy intensa. En cambio, los agregados de las células gliales generaban una reacción positiva diferenciable de los controles negativos, pero con una fluorescencia intermedia. Esto permitió a los investigadores distinguir entre ambas patologías. Así, se habla de curvas tipo 1 (para cuerpos de Lewy, como en el Parkinson y la demencia con cuerpos de Lewy) y de tipo 2 para la atrofia multisistémica.
